研究者：苏敏，张玮，朱成凯，张峰，诸葛宇征
研究机构：南京大医院
肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子（TWEAK）是一个Ⅱ型跨膜蛋白，是肿瘤坏死因子超家族的成员之一，Fn14是目前发现的TWEAK唯一的受体，TWEAK/Fn14信号通路在促炎、血管再生以及调节细胞生长、发育、凋亡等过程中都发挥着广泛的作用。
TWEAK/Fn14在一些肝损伤模型中可起到促进作用，故而可能促进肝纤维化的进程，但该通路在肝纤维化过程中的具体作用机制，尤其是在活化HSC的迁徙方面的作用尚不清楚。
正常情况下，HSC位于Disse腔内，胞浆中有含类视黄醇物质的脂滴，当各种病理因素作用下HSC由静止状态被激活，活化的HSC发生细胞形态、增殖、代谢和功能的变化，同时细胞的迁徙特性也增加。HSC迁徙是肝纤维化形成过程中所必须的，HSC迁徙缺陷时，在致纤维化因素下很少发生肝纤维化。HSC的迁徙能力增加导致炎症区域活化的HSC数目显著增多，直接参与损伤修复。
同时活化的HSC也向肝内更广泛的区域移行，加速ECM沉积，从而导致损伤区域的扩散，促进肝纤维化的发生和发展。本研究通过加入TWEAK及干扰TWEAK受体Fn14的方法验证了TWEAK/Fn14信号通路能增加LX-2细胞迁徙能力。增强HSC迁徙能力的分子机制目前尚不清楚，既往研究报道与细胞形态、骨架结构和细胞因子等多种因素相关。
MMP9属于基质金属蛋白酶家族中的一员，以无活性的酶原形式从细胞内分泌到细胞外，经过一系列的酶联反应被激活而发挥生物学作用。在肝纤维化中，MMP9被发现与肝损伤及炎症反应程度存在相关性，在非酒精性脂肪性肝病及丙型肝炎患者中尤为明显。
有研究显示MMP9与HSC迁徙密切相关，MMP9被激活后发挥蛋白水解作用降解胶原成分，从而促进HSC迁徙；同时MMP9还能激活TGFβ，后者作为经典的促肝纤维化细胞因子，不仅具有强大的促进HSC增殖的能力，还能大大增强HSC的迁徙能力。
本研究结果发现，TWEAK/Fn14通路可以上调MMP9的表达水平，其表达量随着TWEAK作用时间延长而增加，且下调Fn14后再加入TWEAK处理，MMP9的表达量下降，因此TWEAK/Fn14信号通路增强HSC的迁徙能力，考虑是由于升高MMP9的水平导致。并且由于TWEAK促炎作用是促进肝纤维化进程的基础。
real-timePCR检测干扰Fn14基因后mRNA水平的表达变化。结果显示，3条干扰序列都能降低Fn14mRNA的表达水平，其中第2条序列的干扰效果最好，下降（0.±0.）倍。同时蛋白水平也显示第2条序列的干扰效果最佳，所以选择第2条序列进行后续实验
分别检测加入TWEAK后0、3、6、12及24h，MMP9的mRNA及蛋白表达水平变化情况。结果显示，加入TWEAK后MMP9的mRNA水平明显升高，其中3h升高（1.27±0.25）倍，6h升高（2.37±0.25）倍,12h升高（5.02±0.22）倍,24h升高（8.55±0.03）倍。同时MMP9蛋白水平也随着TWEAK作用时间延长表达量逐渐增加
将阴性对照及转染过Fn14siRNA的LX-2细胞分别加入TWEAK处理，检测MMP9的mRNA及蛋白水平表达变化情况。结果显示，si#2+TWEAK组MMP9的mRNA表达量较阴性对照+TWEAK组降低，下降（0.81±0.04）倍。同时si#2+TWEAK组MMP9蛋白水平也较阴性对照+TWEAK组降低
笔者推测TWEAK促进HSC迁徙的作用与肝损伤及炎症反应程度存在相关性，这种作用还与哪些炎症相关细胞因子及信号通路等相关仍需要在今后的研究中作进一步探讨。引证
本文
苏敏，张玮，朱成凯，等.肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子及其受体对肝星状细胞迁徙的影响［J］.临床肝胆病杂志,,34(1):-.
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