壳多糖酶3样蛋白1在原发性肝癌中的检测及

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作者:饶春美房萌洪松沈佳斌

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我国肝癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)发生率居于所有肿瘤发生率的第4位[1](男性第3位),仅次于肺癌、胃癌和结直肠癌,死亡率更是仅次于肺癌排第2位。目前肝癌诊断主要依靠影像学检查、血清标志物、穿刺活检等手段。其中血清标志物主要以公认并进入临床应用的甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)、甲胎蛋白异质体(alpha-fetoprotein-L3,AFP-L3)、异常凝血酶原(prothrombininducedbyvitaminKasbsence-Ⅱ,PIVKAⅡ)等为代表,随着蛋白质及分子生物学技术的发展,不断有新的标志物被发现并逐步应用于临床,如microRNA以及磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(glypican3,GPC3)、N-糖标志物等[2],但是仍远远不能满足临床对肝癌早期诊断及疾病分层管理的需求。

壳多糖酶3样蛋白1(chitinase3-like1,CHI3L1)又称人软骨糖蛋白39(humanchondrocyteprotein39,YKL-40),是几丁质酶蛋白家族的一员,在多种恶性肿瘤中表达水平升高,包括消化系统的胃癌[3]及肝癌、生殖系统子宫内膜癌[4]、卵巢癌[5]、肺癌[6]、鳞状细胞皮肤癌[7]等,并提示预后不良。CHI3L1可通过促进肿瘤血管生成、增加黏附促进肿瘤侵袭和转移、激活转化生长因子-β(transforminggrowthfactor-β,TGF-β)/丝裂原活化蛋白激酶(mitogenactivatedproteinkinase,MAPK)/细胞外信号调节激酶(extracellularsignalregulatedkinase,ERK)等信号通路在肿瘤的发生发展过程中起调节作用。本研究通过探索CHI3L1在原发性肝细胞癌血清、配对癌组织和癌旁组织中的表达情况,探讨CHI3L1在原发性肝癌临床分层管理中的价值。

对象与方法

一、对象纳入至年在海军医院就诊的并经病理诊断明确为原发性肝细胞癌患者例,排除非乙肝患者及丙肝感染患者,最终入组乙肝相关原发性肝细胞癌患者例,同时收集例肝硬化患者血清样本、名本院健康体检人员血清样本作为疾病和健康对照,肝硬化的入选标准参考《肝硬化诊治指南版》。血清样本均于手术前空腹采集,经×g离心力离心20min后分离血清于-80℃保存。收集病理明确诊断为原发性肝癌患者手术切除肿瘤组织样本及配对的邻近癌组织的癌旁组织样本90对制成组织芯片,组织芯片对应的临床信息参见本课题组已发表论文[8]。其中所有患者均已签署知情同意书并经海军医院伦理委员会批准(审批号:EHBHKY-01-)。二、方法1.试剂与仪器:壳多糖酶3样蛋白1检测试剂盒(酶联免疫法)购自杭州普望生物技术有限公司,仪器为购自上海热点仪器有限公司的MIK3酶标仪和美国Biotek公司Elx50洗板机。上海西唐实业有限公司提供组织芯片免疫组化染色及结果判读服务,免疫组化染色CHI3L1特异性抗体为鼠源多克隆抗体(ab),购自英国Ab


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